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酸性紅1，是一種工業(yè)染料，它有4個(gè)別名：偶氮熒光桃紅、偶氮焰紅，酸性紅G，食品紅10。

它的長(zhǎng)相是這樣的：

哇?。∫豢淳筒皇鞘裁茨艹缘臇|西??！

然鵝，就是有一些不法商販會(huì)在食品中添加酸性紅1，目前我國(guó)尚無(wú)相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。月旭科技親自采購(gòu)了酸性紅1標(biāo)準(zhǔn)品、從各大超市采購(gòu)紅酒、紅棗、火腿腸、酸奶作為實(shí)際樣品，開(kāi)發(fā)出食品中酸性紅1檢測(cè)的方法。該方法快速高效，靈敏度高，重現(xiàn)性好。

1、適用范圍
適用于紅酒、紅棗、火腿腸、酸奶等基質(zhì)中酸性紅1的檢測(cè)。

參考標(biāo)準(zhǔn)：《GB 5009.35-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中合成著色劑的測(cè)定》

目前酸性紅1還沒(méi)有具體的標(biāo)準(zhǔn)，我們根據(jù)GB 5009.35-2016的方法，優(yōu)化了提取步驟，使樣品在過(guò)PA小柱后，回收率高，凈化效果好，方法穩(wěn)定性好。

2、相關(guān)試液的配置

1) 準(zhǔn)確稱(chēng)取酸性紅1標(biāo)準(zhǔn)品50mg，用10%甲醇水溶液溶解并定容到50mL，得到1000μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液

2) 準(zhǔn)確移取酸性紅1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 1000μg/mL 5mL，用10%甲醇水溶液稀釋并定容到50mL，得到10μg/mL標(biāo)準(zhǔn)使用液

3) 提取液A配置：取100mL乙醇，50mL乙腈互溶；然后取其中140mL乙醇：乙腈（2：1）混合液，加入60mL水和2mL的氨水。

4) 檸檬酸溶液：稱(chēng)取 20 g 檸檬酸（C6H8O7·H2O），加水至 100 mL，溶解混勻。

5) pH=6 的水：500ml的水加檸檬酸溶液調(diào)節(jié)至 pH 到 6，如果水pH偏低于6可以直接使用。

6) pH=4的水:500ml的水加檸檬酸溶液調(diào)節(jié)至 pH 到 4。

7) 甲醇：甲酸（6：4）：取甲醇150mL+甲酸100mL。

8) 洗脫劑：先取2mL的氨水定容至100mL成為2%的氨水溶液；再用20mL的2%氨水溶液加70mL乙醇加10mL水。

9) 10%甲醇：10mL甲醇加90mL水。

10) 乙酸銨溶液（0.02mol/L）：稱(chēng)取1.54g乙酸銨，加水至1000mL，溶解，經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾。

3、提取步驟

一、紅酒

取1mL樣品加入0.3mL甲酸，振蕩，待凈化。

二、紅棗

（1）將1.000g樣品置于50 mL 離心管，加入20mL提取液A，振蕩2min，60℃水浴超聲10min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（2）再向下清液加入提取液A10mL，振蕩2min，水浴超聲10 min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（3）重復(fù)（2）的過(guò)程。收集3次上清液，再次6000rpm下離心2min（為了使上清液固體顆粒減少，從而加快上樣等步驟）；

（4）在40℃水浴條件下，減壓蒸至約12mL，再加3mL甲酸混勻，待凈化。

三、火腿腸

（1）將1.000g樣品置于50 mL 離心管，加入1.0gC18粉末，加入20mL提取液A，振蕩2min，60℃水浴超聲10min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（2）再向下清液加入提取液A10mL，振蕩2min，水浴超聲10 min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（3）重復(fù)（2）的過(guò)程。收集3次上清液，再次6000rpm下離心2min（為了使上清液固體顆粒減少，從而加快上樣等步驟）；

（4）在40℃水浴條件下，減壓蒸至約12mL，再加3mL甲酸混勻，待凈化。

四、酸奶

（1）將1.000g樣品置于50 mL 離心管，加入20mL提取液A，振蕩2min，60℃水浴超聲10min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（2）在40℃水浴條件下，減壓蒸至約7mL左右，再加1.5mL甲酸混勻，待凈化。

4、SPE凈化步驟
SPE柱：月旭Welchrom? PA(聚酰胺)小柱，規(guī)格：1000mg/6mL。

a)活化：加入5 mL甲醇活化Welchrom? PA柱，5mL水，5mL pH=6的水，棄去流出液。

b)上樣：將提取液加入Welchrom? PA柱中，棄去流出液，注意不要讓小柱溶劑流干。

c)淋洗：依次用10mLpH=4的水，20mL甲醇：甲酸（6：4），10mLpH=7的水淋洗，棄去流出液。

d)洗脫：用15mL2%氨水：乙醇：水（2+7+1）洗脫，收集流出液，壓干小柱。

e)濃縮：將收集的洗脫液在80℃水浴蒸干，再用10%甲醇水復(fù)溶并定容至2mL。

6、色譜條件

色譜柱：月旭Ultimate?XB-C18（4.6 x 250 mm, 5 μm）
流動(dòng)相：乙酸銨/乙腈梯度；

流速：1.0 mL/min
進(jìn)樣量：20 μL
柱溫：30 oC
檢測(cè)波長(zhǎng)：534 nm

7、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果

圖1：酸性紅1標(biāo)準(zhǔn)品0.5mg/L 

圖2：酸性紅1-紅酒加標(biāo)10mg/kg

、

圖3：酸性紅1-紅棗加標(biāo)1 mg/kg

圖4：酸性紅1-火腿腸加標(biāo)1 mg/kg

圖5：酸性紅1-酸奶加標(biāo)1mg/kg

表1：加標(biāo)回收率測(cè)定結(jié)果

8、結(jié)論

使用月旭Welchrom? PA柱可以快速、高效檢測(cè)紅酒、紅棗、火腿腸、酸奶中的酸性紅1，方法的靈敏度高，重現(xiàn)性好。

9、相關(guān)產(chǎn)品信息